抗体芯片在IL13参与胃炎向化生发展机制

白癜风专家李从悠 https://www.sohu.com/a/330332735_120224920

杂志名称：CellularandMolecularGastroenterologyandHepatology

影响因子：9.

文献题目：IL13ActsDirectlyonGastricEpithelialCellstoPromoteMetaplasiaDevelopmentDuringChronicGastritis

第一作者：ChristineN

通讯作者：RichardJ.DiPaolo

作者单位：DepartmentofMolecularMicrobiologyandImmunology,SaintLouisUniversitySchoolofMedicine,St.Louis,Missouri

本实验所用产品：-mousecytokinearray(GS;RayBiotech;PeachtreeCorners,GA)

实验样品：细胞上清

研究背景：

慢性炎症可促进胃癌相关化生，但对免疫细胞和细胞因子调节化生细胞变化的机制知之甚少。本研究的目的是鉴定产生白细胞介素13（IL13）的免疫细胞，确定胃上皮细胞对IL13的反应，并确定IL13在化生发展中的作用。研究人员在发炎的胃中鉴定出6种独特的产生IL13的免疫细胞亚群。类器官培养显示，IL13直接作用于胃上皮细胞，诱导形成化生表型。IL4Ra缺陷小鼠没有进展为化生。单细胞RNA测序确定IL4Ra缺陷小鼠的胃上皮细胞上调炎症基因，但未能上调化生相关转录物。IL13的中和作用显著减少并逆转胃炎小鼠的化生发展。最后得出结论，IL13在慢性胃炎期间由多种免疫细胞亚群产生，并促进胃癌相关的化生上皮细胞变化。在慢性胃炎期间，IL13的中和可降低化生的严重程度。

结果：

1.1慢性胃炎小鼠胃粘膜中产生IL13的免疫细胞亚群的鉴定

研究团队为了进一步研究IL-13产生的免疫机制，该研究鉴定了慢性胃炎小鼠胃粘膜中免疫细胞亚群分泌的细胞因子，并从TxA23小鼠慢性炎症的胃粘膜中分离免疫细胞建立模型进行了比较分析，结果发现Th1和Th17是小鼠和人类在慢性幽门螺杆菌感染和自身免疫性胃炎期间的主要免疫反应。并确定IFNg和IL17都直接作用于胃粘膜27。

1.2IL13直接作用于小鼠和人类胃上皮细胞，改变类器官细胞组成，增加类器官大小、活力，并上调化生相关基因

为了进一步观察类有机物与对照组间的比较，对IL13培养的类器官进行转录和成像分析。结果发现，除了增加胃类器官的大小和活力外，IL13还增加了Muc6的表达，降低了Muc5ac的水平。

研究人员为了确定IL13是否对人类胃上皮有类似的作用，使用人体来源的胃类器官重复了上述实验，然后发现IL13在小鼠和人类类器官中引起类似的反应，即类器官大小、活力增加，MUC6表达细胞增加。

紧接着团队确定了IL13是否可能通过作用于IL13培养的类器官中污染的免疫细胞，从而间接影响到类器官，结果发现IL13直接作用于胃上皮，而不是周围的免疫细胞，以促进类器官大小和生存能力的增加。

1.3IL4Ra表达对炎症诱导的颈部细胞扩张和化生发育至关重要

在胃粘膜中鉴定出产生IL13的免疫细胞，并证明IL13在类器官培养中直接作用于胃上皮细胞后，研究团队为了进一步确定IL13信号在慢性胃炎诱导的胃病理学中的重要性。将TxA23小鼠与IL4Ra缺陷小鼠杂交，产生一个新的TxA23Il4ra-/-小鼠系模型，并且通过免疫荧光染色比较SPEM的发展，结果表明，虽然通过IL4Ra发出的信号不一定会发展为伴有萎缩的中重度胃炎，但在慢性炎症环境中，通过该受体发出的信号对于颈部细胞扩张和化生（SPEM）的诱导非常重要。

1.4对照组和IL4Ra缺陷小鼠胃粘膜中的免疫细胞亚群和蛋白质分泌相似

为了确定IL4Ra信号的缺乏是否影响浸润胃粘膜的免疫细胞分泌细胞因子，研究团队通过流式细胞术对CD45免疫细胞进行门控，再进一步使用-mousecytokinearray(GS;RayBiotech;PeachtreeCorners,GA)进行蛋白比较分析，使用蛋白质芯片分析上清液，以鉴定和比较来自对照TxA23和TxA23Il4ra-/-小鼠的免疫细胞分泌的种蛋白质的水平。在图6B中，每个点代表一个单独的蛋白质，来自TxA23和TxA23Il4ra-/-的激活免疫细胞的上清液中的相对水平在轴上进行量化。所有种蛋白质的表达水平几乎相同。只有3种蛋白质（IL6、IL1RA和血管内皮生长因子）存在显著差异，所有差异均小于3倍。总之，这些数据确定了从胃粘膜分离的免疫细胞种分泌蛋白的相对表达水平，并表明TxA23和TxA23Il4ra-/-小鼠之间的免疫细胞类型和分泌蛋白几乎相同。

1.5IL4Ra缺陷的颈部和主细胞上调炎症相关基因转录，并采用SPEM前表型，但在慢性炎症期间不会发展为SPEM

为了进一步对确定IL4/IL13信号是否上调炎症反应基因，研究人员对TxA23和TxA23Il4ra-/-粘液颈部细胞之间转录差异进行了分析，结果发现，共有41个差异表达基因的变化大于2倍（图7D）。与TxA23Il4ra-/-相比，TxA23颈部细胞中的SPEM相关转录物Gkn3、Tff2、Muc6、Spink4和Xist显著上调，而Agr2在两个文库中的表达相似（图7F）。转录表达的主细胞比较确定了21个差异表达基因，其变化大于2倍（图7E）。

1.6IL13对炎症诱导的粘液细胞扩张和化生发育至关重要

为了确定IL13信号是否有助于慢性炎症期间的疾病病理，研究人员用IL13中和抗体治疗TxA23小鼠，并确定治疗对疾病发展的影响，结果是发现与同型对照组（2.8±0.63vs0.57±0.2；P?.）和3个月大的TxA23（1.9±0.34vs.2）相比，抗IL13治疗组小鼠几乎没有出现颈部粘液细胞扩张。并且研究团队使用免疫荧光染色评估胃中是否存在SPEM。结果表明IL13在慢性炎症期间促进颈部细胞扩张和SPEM发育中发挥重要作用。

结论：

研究团队通过鉴定白细胞介素13（IL13）-pro-诱导免疫细胞，测定胃上皮细胞增殖-响应IL13，从而确定了IL13在化生发育，通过使用Raybiotech抗体芯片帮助确定了颈部和主细胞都开始表达炎症相关基因（即MHCI类、MHCII类），以及化生相关基因的上调（Tff2、Muc6、Gkn3和Xist），进一步强调了IL13在胃炎向化生发展过程中的关键作用。

（原文点击末端）

在科研领域，RayBio累计支持客户发表影响因子3分以上的SCI文章超过余篇，影响因子超过分，影响因子5的文章超过篇，影响因子15的文章超过篇，影响因子20的文章超过篇。RayBio作为国际领先的蛋白芯片和免疫产品专业供应商，拥有世界上种类最多的抗体芯片及ELISA及产品，其产品检测灵敏度高，种属多样，包括涵盖人、小鼠、大鼠、猪、马、牛、猴、犬、猫、兔等多个种属。预览时标签不可点收录于话题#个上一篇下一篇

转载请注明：http://www.mzvgu.com/jbwh/13310.html