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临床检验基础学习笔记



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第一章血液一般检查

一名词解释

⒈血浆:全血标本经抗凝离心去除血细胞成分后即为血浆,主要用于化学和凝血项目检测等

⒉血清:为血液离体凝固后分离出来的液体,主要用于化学和免疫学等项目检测

⒊抗凝:采用物理或化学的方法去除或抑制某种凝血因子的活性,以阻止血液凝固的方法称为抗凝

⒋抗凝剂:能够阻止血液凝固的化学物质称为抗凝剂

二填空题

⒈血液由55%血浆和45%血细胞两部分组成,血细胞包括红细胞、白细胞、血小板

⒉血液标本类型全血、血浆、血清、血细胞

⒊血液标本按采集部位分为动脉全血、静脉全血、末梢全血

⒋成人静脉采血以肘正中静脉、手背静脉、内踝静脉和股静脉为多

三大题

⒈血液的七个理化性质[静儿1]

(1)血量[静儿2]:(70+—10ml/kg)6%~8%妊娠期妇女血量增加了23%~25%婴幼儿略高于成人

(2)颜色[静儿3]:Hb氧饱和度

A氧合Hb鲜红色

V还原Hb暗红色

CO和氰化物中毒呈现樱红色

(3)PH[静儿4]:7.35-7.45

A:7.40V:7.35

维持稳定缓冲对

血液:碳酸氢根/碳酸

红细胞:HbH(血红蛋白)/KHb血红蛋白钾盐)

(4)比密:红细胞1.血浆1.~1.

全血

男性1.~1.

女性1.~1.

(5)渗透压[静儿5]

~mosm/kg.H2O

(6)黏稠度:

血浆黏度为生理盐水1.6倍全血黏度为生理盐水4~5倍

(7)红细胞在血浆中的悬浮稳定性唾液酸根Zeta负电位

修正补充:

血浆的缓冲物质包括NaHCO3/H2CO3、蛋白质钠盐/蛋白质和Na2HPO4/NaH2PO4

三个主要的缓冲对,其中以NaHCO3/H2CO3最为重要。

此外,红细胞内还有血红蛋白钾盐/血红蛋白、氧合血红蛋白钾盐/氧合血红蛋白、K2HPO4/KH2PO4、KHCO3/H2CO3等缓冲对参与维持血浆PH值的恒定。

⒉抗凝剂

抗凝剂

抗凝原理

临床用途

EDTA盐(乙二胺四乙酸盐)

ICSH建议血c计数用EDTA-K2作为抗凝剂1.5~2.2mg/ml,18~25℃

与血液中的钙结合形成螯合物,使钙失去凝血作用,从而阻止血液凝固(钙是IV凝血因子)

全血细胞分析(CBC),尤其适用于血小板计数

注:不适用血小板功能、凝血因子

枸橼酸钠(柠檬酸钠)

mmol/L(32g/L)浓度的水溶液

同上

血栓与止血检验(1:9)

血沉测定(1:4)

血液保养液(ACD液)

肝素

广泛存在于肺、肝、脾以及肥大细胞、嗜碱性粒细胞的颗粒中,是一种有硫酸基团的黏多糖,分子量为

(肝素与血液比为1:10)

加强抗凝血酶Ⅲ,灭火丝氨酸蛋白酶(促进其对凝血因子Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ)和凝血酶活性的抑制,抑制血小板聚集,从而达到抗凝)

血细胞比容测定

临床生化项目

注:不适用于凝血功能、白细胞计数和分类计数检查(可使白c聚集并使血涂片染色后产生蓝色背景)

草酸钠

草酸钠与血液1:9

草酸钠可与血液中的钙形成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固

血栓与止血检查

双草酸盐

同上

草酸钾0.8g可使红细胞体积缩小

草酸铵1.2g可使红细胞胀大血细胞比容、血细胞计数、网织红细胞计数

注:不适用于血小板计数、白细胞分类计数

⒊成人与婴幼儿采血部位的鉴别

成人

婴幼儿

静脉采血法(轻压1~2分钟)

肘正中静脉、手背部,手腕部、外踝部静脉

颈外静脉、股静脉、大隐静脉及锁骨下静脉

动脉采血法(加压止血)

桡动脉(最方便)、股动脉、肱动脉、足背动脉

皮肤采血法(毛细血管)

手指指端或耳垂

拇指或足跟外侧缘

⒋①静脉采血法

简要操作:选择静脉→消毒→扎压脉带→穿刺→抽血→松压脉带→拔针,同时按压止血→将血液注入试管→混匀

②皮肤采血法

皮肤采血法所获得的血液标本是微动脉血、微静脉血、毛细血管血混合的末梢全血

简要操作:选择采血部位→消毒→针刺→取血→止血→稀释、混匀针刺深度以2~3mm为宜切忌用力过大

血液标本采集顺序:血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定、白细胞计数及白细胞分类计数、血型鉴定

使用塑料采血管分配顺序:血培养管(黄色)、枸橼酸钠抗凝管(蓝色)、加或未加促凝剂或分离胶的血清管、加或未加分离胶的肝素管(绿色)、EDTA抗凝管(紫色)、加葡萄糖分解抑制剂管(灰色)

③动脉采血法

简要操作:选择动脉→消毒→穿刺→抽血→按压止血→封闭针头→混匀

其中封闭针头须立即将针头斜面插入橡皮中或软木塞,以隔绝空气,搓动注射器,使血液与肝素混合,并立即送检

将标本置于2~6℃保存,但保存时间不应超过2小时

溶血的原因:①容器不清洁

②血液接触水分

③标本中的大量泡沫

④强力振荡

⑤注射器带有针头强压注血

⑥分离血清时操作不当

⒌血浆与血清区别

①血清加入抗凝剂变为血浆

②②血清缺乏纤维蛋白原及某些凝血因子(Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ1、2、5、8)

补充:

⒈影红细胞:在低渗、碱性尿液中,红细胞因吸水胀大颜色较浅,甚至血红蛋白从红细胞中溢出成为大小不等的空环形,称影红细胞(P)

⒉促凝剂:(P6)

定义:真空采血时,为了快速分离血清和防止溶血,常常在真空管内预添促凝剂和分离胶。促凝剂是采用非活性硅石等非生理性促凝成分,经特殊加工制成。常用的促凝剂有凝血酶、蛇毒、硅石粉和硅碳酸等。

促凝原理:促凝剂能激活纤维蛋白酶,使可溶性纤维蛋白变成不可溶性的纤维蛋白聚体,进而形成稳定的纤维蛋白凝块。

临床用途:加速血液凝固,快速分离血清标本,缩短了检验时间,具有很高的使用价值,特别适用于急诊化学检查。但离心后,常常还会有少量的纤维蛋白凝块或凝丝悬浮在血清中。

⒊分离胶:

定义:是一种聚合高分子[静儿6]物质,不溶于水,具有抗氧化、耐高温、抗低温、高稳定性等特性。

分离原理:分离胶的比重介于血清与血细胞之间,在~g离心力作用下液化移动到管中央,离心后固化,在血清与血块之间形成隔离层,使血清和血细胞完全分离。

临床用途:分离胶能保证血清化学成分的稳定,在冷藏状态下48小时无明显改变,适用于生化、血库和血清学等相关检验。但分离胶的质量可以影响分离效果和检验结果,且其成本较高。

总结:

⒈公式

⒉PH

①血液pH7.35~7.45A:7.40V:7.35

②血涂片染色法磷酸盐缓冲液PH6.4~6.8:保持染色环境在相对恒定的PH内,使细胞着色稳定(P16)

③HbHiCN转化液文齐液磷酸二氢钾PH7.2+-0.2,防止高球蛋白血液标本混浊(P34表)④尿比重干化学试带法尿液PH及蛋白可影响重测定结果,应进行校正。如尿液PH6.5,结果应加0.;PH8.0时,应加0.。尿蛋白每增加10g/L,结果应减去0.。(P)

⑤尿液PH测定干化学试带法(P)

试带试带模块中主要有麝香草酚蓝和甲基红等成分。

a麝香草酚蓝检测范围为PH6.0~7.6

b甲基红检测范围为PH4.6~6.2。变色范围为橙红(PH4.5)-黄绿色(PH7.0)-蓝色(PH9.0)。

⑥随机尿PH最大范围为4.6~8.0,多数尿为5.5~6.5。(P)

⑦尿液蛋白质定性检查(干化学试带法)(P)

原理:利用指示剂的蛋白质误差原理。在PH=3.2时,溴酚蓝产生阴离子,蛋白质(清蛋白)产生阳离子,二者结合后产生颜色变化,由淡黄色渐呈绿色乃至蓝色

试带:试带模块中主要有:酸碱指示剂溴甲酚蓝或四溴酚蓝二酯,PH阈值为3.0~4.6m

质量保证PH9.0时,使干化学试带法呈假阳性

尿液PH3时则引起干化学法蛋白定性假阴性

⑧本周蛋白又称凝溶蛋白,其特点:在PH4.5~5.5时,加热至40~60℃(通常为56℃)时发生凝固,继续加热至90~℃时溶解,而温度下降到56℃时恢复凝固。(P)

⑨尿液肌红蛋白检查(P)

质量保证标本处理标本要新鲜,以免肌红蛋白变性而被硫酸铵沉淀,导致假阴性。肌红蛋白在酸性环境中不稳定,在碱性(PH8~9)条件下4℃可稳定至少1周,因此如需保存,标本宜碱化后冷藏。

⑩精液一般性状检查(P)

PH7.2~8.0

aPH8.0时,见于急性前列腺炎、精囊炎或附睾炎,可能是精囊分泌过多或前列腺分泌过少所致。

bPH7.0并伴有精液量减少,可能是输精管阻塞、射精管和精囊腺缺无或不良所致。

11.分泌物检查(P)

正常分泌物呈酸性,PH4.0~4.5。PH升高见于各种炎症患者以及绝经后妇女

毛滴虫生长的最适宜PH为5.5~6.0,温度为25~42℃

12.漏出液PH7.4渗出液PH6.8(P)

13.十二指肠引流液检查(P)

是在空腹状态下用十二指肠管采取,根据采集先后顺序分4段采集留取,分别置于标记为D、A、B、C的4支试管中,包括D液(十二指肠液)、A液(胆总管液)、B液(胆囊液)、C液(胆管液)

PH:D液:7.6A液:7.0B液:6.8C液:7.4

13.胃液检查(P)

正常胃液PH0.9~1.8。PH3.5~7.0为低碱,见于萎缩性胃炎、胃癌、继发性缺铁性贫血、胃扩张、甲状腺功能亢进等。PH7为无酸,见于十二指肠球部溃疡、胃泌素瘤、幽门梗阻、慢性胆囊炎、十二指肠液反流等。

⒊渗透压

血液:~mOsm/kg·H2O

尿渗量:~0mOsm/kg·H2O;24小时内最大范围:40~mOsm/kg·H2O;

尿渗量(Uosm)/血浆渗量(Posm)为(3.0~4.7):1.0(P)

脑脊液压力:成人70~mmH2O儿童50~mmH2O

⒋核左移根据其程度可分为轻、中、重三级(P25)

轻度核左移:仅见杆状核粒细胞6%

中度核左移:杆状核粒细胞10%并有少数晚幼粒、中幼粒细胞;

重度核左移(类白血病反应):杆状核粒细胞25%,出现更幼稚的粒细胞如早幼粒甚至原粒细胞,常伴有明显的中毒颗粒、空泡、核变性等质的改变。

根据血红蛋白浓度可将贫血分为4度(P35)

当Hbg/L(女性g/L)时,为轻度贫血

Hb90g/L时,为中度贫血

Hb60g/L时,为重度贫血

Hb30g/L时,为极重度贫血

当Hb45g/L时,应考虑输血

清洁度判断标准(P)

清洁度

杆菌

球菌

白(脓)细胞(个/HP)

上皮细胞

4+

0~5

4+

2+

-或少许

5~15

2+

-或少许

2+

15~30

-或少许

4+

30

透明度

脑脊液透明度:清澈透明(P)

关节腔积液透明度:清亮、透明(P)

浆膜腔积液检查的临床应用(P)

漏出液透明度:透明、偶见微混

渗出液透明度:多为混浊

羊水检查:妊娠早期:无色或淡黄,清晰、透明;妊娠晚期:乳白色,混浊(P)

胎儿各器官成熟度的判断指标及判断方法(P)

项目

判断指标

判断方法

胎儿肺成熟度

羊水泡沫试验

羊水卵磷脂/鞘磷脂(L/S)

羊水磷脂酰甘油(PG)

阳性:提示胎儿肺已成熟

L/S≥2:提示胎儿肺已成熟

妊娠35周后羊水PG阳性:提示胎儿肺已成熟

胎儿肾脏成熟度

羊水肌酐(umol/L)

羊水葡萄糖(mmol/L)

.8,提示胎儿肾脏已成熟

.6~.7,提示胎儿肾脏成熟可疑

.5,提示胎儿肾脏未成熟

0.56,提示胎儿肾脏成熟

0.80,提示胎儿肾脏未成熟

胎儿肝脏成熟度

羊水△A胆红素

0.02,提示胎儿肝脏已成熟

0.02~0.04,提示胎儿肝脏成熟可疑

0.04,提示胎儿肝脏未成熟

胎儿皮肤成熟度

羊水脂肪细胞

20%,提示胎儿皮肤已成熟

10%~20%,为临界值

10%提示胎儿皮肤未成熟

50%,提示胎儿皮肤过成熟

胎儿唾液腺成熟度

羊水淀粉酶

U/L提示胎儿唾液腺成熟

⒈血小板计数(P49)

血小板是由成熟巨核细胞质脱落产生,具有维持血管内皮完整性以及黏附(GpⅠb)、释放、聚集(GpⅡb/Ⅲa)、血块收缩和促凝作用等功能。血小板计数和血小板形态检查是常用的,血液一般检验项目。

血小板计数(PLT):是测定单位容积血液中血小板的数量,是重要的血栓与止血筛查试验之一。

㈠显微镜计数方法

⒈原理:血液经稀释液稀释和破坏红细胞后,混匀、充池、在显微镜下计数一定范围内的血小板数量,经过换算求出每升血液中血小板的数量。

⒉试剂

①草酸铵稀释液:由草酸铵、EDTA-Na2和H2O组成。其中草酸铵作用是破坏红细胞,EDTA-Na2抗凝。

②复方尿素稀释液:(许汝和液):由尿素、EDTA-Na2、甲醛和H2O组成。其中尿素作用是破坏红细胞,EDTA-Na2抗凝,甲醛固定血小板。

3简要操作

取稀释液0.38ml→取血20ul,混匀→充池→静置→高倍镜下计数中央大方格的四角和中央5个中方格内血小板数量→计算。

㈡质量保证

㈢方法学评价

㈣参考区间

(~)×10∨9/L

㈤临床意义

血小板数量随时间和生理状态的不同而略有变化,

①午后略高于早晨

②春季较冬季低

③平原居民较高原居民低

④月经前减低,月经后增高,分娩后减低

⑤运动、饱餐后增高,休息后恢复

⑥静脉血血小板计数比毛细血管血高10%

血小板减少是引起出血的常见原因。

当血小板数在(20~50)×10∨9/L,可有轻度出血或手术后出血

低于20×10∨9/L,可有较严重的出血

低于5×10∨9/L,可导致严重出血

血小板计数超过×10∨9/L为血小板增多

病理性血小板减少和增多的原因及临床意义

血小板

原因

临床意义

减少

生成障碍

急性白血病、再生障碍性贫血、骨髓肿瘤、放射性损伤、巨幼贫血等

破坏过多

特发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进、系统性红斑狼疮等

消耗过多

DIC、血栓性血小板减少性紫癜等

分布异常

脾大、血液被稀释等

先天性

新生儿血小板减少症、巨大血小板综合征等

增多

原发性

慢性粒细胞白血病、原发性血小板增多症、真性红细胞增多症等

反应性

急性化脓性白血病、大出血、急性溶血、肿瘤等

其他

外科手术后、脾切除后等

⒉血栓与止血一般检查

①ATPP(活化部分凝血活酶时间):是在体外模拟体内内源性凝血的全部条件,测定血浆凝固所需的时间,以反映内源性凝血因子是否异常和血液中是否存在抗凝血物质,是常用而且比较灵敏的内源性凝血系统的筛检指标之一。(P55)

25~35秒,超过正常对照值10秒为异常

②PT(凝血酶原时间):是在体外模拟体内外源性凝血的全部条件,测定血浆凝固所需的时间。PT是常用的外源性凝血途径和共同凝血途径的筛检指标之一。(P53)

PT:成人11~13秒,新生儿延长2~3秒。超过正常对照值3秒为异常

③BT(出血时间):使用出血时间测定器(TBT)在受检者前臂皮肤上造成一个标准切口,记录血液自行流出到自然停止所需要的时间,即为出血时间(BT)。(P52)

TBT:(6.9+-2.1)分钟

④TT(凝血酶时间):是反应血浆中纤维蛋白原转变为纤维蛋白的筛检指标之一。TT延长主要反映Fg浓度减少或功能异常以及血液中存在相关的抗凝物质(肝素、类肝素等)。(P56)

16~18秒,超过正常对照值3秒为异常

⒊葡萄糖定性方法学评价

方法

评价

班氏法

敏感度低,特异性差,操作烦琐,但稳定性好,检测范围为5.5~g/L,可检出所有还原性糖。大剂量维生素C、肌酐、尿酸可引起假阳性。目前已逐渐被葡萄糖氧化酶试带法取代

干化学试带法

敏感度高,特异性好,只与葡萄糖反应,极少出现假阳性;操作简单、快速,检测范围为1.67~g/L。大剂量维生素C、高浓度酮体、高比重尿易降低反映敏感度而出现假阴性。目前已广泛普及

薄层层析法

是鉴别、确证尿糖种类的特异实验,但操作烦琐,不适合临床常规标本的测定

⒋蛋白质定性方法学评价

方法

评价

加热乙酸法

准确,可与尿中所有蛋白质反应,假阳性少。通常作为蛋白质的确证实实验,但操作比较复杂

磺基水杨酸法

操作简便,敏感度高。清蛋白、球蛋白、本周蛋白均可检出,简便、快速曾为CCCLS推荐为参考方法。但干扰因素多,有些药物及盐类结晶可致假阳性

干化学试带法

简便、快速,广泛用于健康普查和肾病筛查,但结果受尿液PH影响。对清蛋白敏感度高,对球蛋白灵敏度仅为清蛋白的1/~1/50,与血红蛋白、肌红蛋白、黏蛋白、Tamm-Horsfall蛋白(T-H蛋白)及本周蛋白等基本不反应

量词

序数词

onetwothreefourfivesixseveneight

nineteneleventwelvethirteenfourteenfifteensixteen

seventeeneighteennineteentwentytwenty-onethirtyfortyfiftysixtyseventyeightyninety

hundred百thousand千tenthousand万(十千)

hundredthousand十万(百千)

million百万

billion十亿

trillion万亿

表示顺序的词

first第一secondthirdfourthfifthsixthseventheighthninthtenthtwelfth

基数词作分子,序数词作分母,除了分子是‘1’以外,其他情况序数词都要用复数式

threefourths或threequarters(四分之三)

onethird或athird(三分之一)

twenty-fourtwentyfifths(二十五分之二十四)

threeandonefourth或threeandonequarter(三又四分之一)

ahalf(二分之一)

oneandahalf(一又二分之一)

oneandaquarter(一又四分之一)

Monday(星期一)TuesdayWednesdayThursdayFridaySaturdaySunday

January(一月)FebruaryMarchAprilMayJuneJulyAugustSeptemberOctoberNovemberDecember

表示颜色的词:

blue(蓝色)green(绿色)purple(紫色)yellow(黄色)red(红色)pink(粉红色)cyan(青色)white(白色)black(黑色)orange(橙色)brown(棕色)gray(灰色)tea(茶色)beige(米色)salmonpink(橙红色)Khaki(卡其色)olivegreen(橄榄绿)aquamarineblue(蓝绿色)

mave(紫红)oysterwhite(乳白色)sandybeige(浅褐色)silver(银白色)gold(金色)

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